Влиянието на рафинозната диета и варени семена от бобови култури върху някои процеси в дебелото черво.

Документи

Стенограма на влиянието на рафинозна диета и варени семена от бобови култури върху някои процеси в дебелото черво.

Храната 31 (1987) 10,971-980

Институт за храни и хранене (директор: проф. Д-р мед. W. B. sZOSTAK), warSZaWa, VR Полша

Влиянието на рафиозната диета и варени семена от бобови растения върху някои процеси в дебелото черво на плъхове B. JAC

Бяха изследвани промените в стойността на рН, ензимната активност и микрофлората в съдържанието на дебелото черво на плъхове след хранене с рафинозен улей и варени семена от бобови растения (соя, грах, боб). Както храненето с диета, съдържаща 12% рафноза, така и храненето с легурнозни семена доведоха до понижаване на рН; Въпреки това, когато се прилагат някои други диети (например мляко на прах или суров перлен ечемик), се наблюдава понижаване на стойността на рН. Забележителна активност на α-галактозидаза след легуминоза е открита в дебелото черво на плъховете, но не и в тънките черва. Източникът на галактозидазната активност вероятно са бактерии със съдържание на дебелото черво (Lactobacillus sp., Enterococncr, Escherichia colq. Не могат да бъдат установени връзки между вида на дийта и изолираната микрофлора.

Предполага се, че захаридите от семейство рафинози (рафиноза, стахиоза, вербаскоза) са сред факторите, които намаляват хранителната стойност на семената от бобови растения. Тъй като в храносмилателната система липсват ензими, които разграждат а-галактозахаридите, те не могат да бъдат усвоени нито от хората, нито от много животни [l -31.

Когато плъховете ядат варени семена от соя, грах и фасул в продължение на няколко дни, фекалиите на животните съдържат количество галактозахариди, което едва ли съставлява 2-5% от количеството, приложено с диетата [4]. Разцепването на тези захариди може да стане в дебелото черво под въздействието на ензими на чревната флора. Това създава много газове, особено водород и въглероден диоксид [напр. Б. 5-71. Количеството водород, отделено по време на "газообразуващия процес", който се създава след поглъщане на бобови растения, показва положителна корелация с количеството галактозахариди, приложени в храната [8,9].

CRISTOFARO u. а. [ето] обърна внимание на промяната в рН в дебелото черво на плъховете по време на храносмилането на соево брашно. Те видяха това явление във връзка с образуването на газове след консумация на брашното. Диетата с казеин или месо не е довела до образуване на газове или понижаване на рН в дебелото черво. Авторите установяват намаляване на рН в дебелото черво на плъховете, дори когато 1-3% вербаскоза се прилага с диетата, но те не изследват влиянието на други галактозахариди.

Цел на дипломната работа: задълбочаване на познанията по биохимични и микробиологични

972 Храната 31 (1987) 10

Процеси, които се случват в организма след консумация на семена от бобови растения. Този проблем е продължение на по-ранни проучвания [4] и е свързан с повишения интерес, проявен в Полша през последните години към увеличаване на дела на бобовите семена в храненето на хората и животните.

Експериментални животни urid Pluri на биологични изследвания

За разследванията бяха използвани около 6-месечни бели мъжки плъхове Wistar (безплодни) с тегло (350-10) g от нашата собствена порода. Във времето между евакуацията на плъховете и началото на експериментите животните са били хранени с индустриално произведения размножителен мръсотия "Murigran". По време на проучванията плъховете са били държани индивидуално в метаболитни клетки; на всяко животно е даван експериментален дилт и вода (по желание ), където се проверява количеството консумирана храна и се определя наддаването на тегло. Продължителност на прегледите: 96 ч. Планът за преглед е показан в таб.

Таблица 1 График на биологичните изследвания (брой плъхове, изследвани в скоби)

Вид диета Продължителност на прегледа [h]

Завършил развъждане Murigran (контролен завършил I) PH (12) E (5) B (5)

Завършил развъждане Муригран + 4 "/, рафиноза Завършил развъждане Муригран + 8"; Диета за отглеждане на рафиноза Муригран + 12 "', готвена соя от рафиноза

Ечемичени зърнени култури (сурови) Овесени люспи Пюрешки кифлички от брашно Варени картофи Сушено пълномаслено казеиново нишесте диета без RaEnose PH (6) (контролна диета 11) E (3)

B (6) Казеинова скорбялна диета + 4? O Рафиноза казеинова скорбялна диета + 8 4; Диета с нишесте с рафиноза казеин + рафиноза 12 ° С

pH - определяне на стойността на pH, E - определяне на ензима, B

РЗИНСКИ: Рафинозна диета 973

Преди да бъдат извършени химичните, ензимните и бактериологичните определяния, животните са обезглавени между 8 и 9 часа сутринта и е взето съдържанието на дебелото черво от всеки плъх. В допълнение, рН на чревното съдържимо се определя при 21 плъхове, след като им се прилага 300 mg рафиноза (2 ml 15% разтвор) от сонда. Промените в рН на съдържанието на дебелото черво са тествани при 160 от общо 200 опитни животни. Допълнителни ензимни активности се определят при около 30 плъха, при които се определя рН на съдържанието на дебелото черво. Ако трябва да се определи ензимната активност в тънките черва, лигавицата се отстранява от вътрешния епител на участък от червата, който се намира на около 20 см от дебелото черво. В допълнение към определянето на рН на съдържанието на дебелото черво са проведени бактериологични изследвания на около 45 плъхове.

Действителните биологични експерименти бяха предшествани от предварителни експерименти върху около 40 други плъхове; Също така беше определено до каква степен животните приемат прилаганите диети (включително чиста глюкоза, галактоза, захароза, лактоза и рафиноза).

Прилагани са следните диети: 1. Казеинова нишестена диета (без рафиноза) според HEDIN u. а. [Използвах 11 в по-ранни разследвания

е бил. [4] Съдържа: 18% казеин, 8% соево масло, 5% смес от минерална сол, 14% целулоза, 1% витаминна смес, 54 7; Пшенично нишесте. Тази диета беше една от двете контролни диети.

2. Казеинови нишестени диети с 4, 8 и 12% рафиноза. При тези диети част от пшеничното нишесте (4, 8 и 12%) е заменена с рафиноза. Използва се D (+) - рафиноза (пентахидрат) от Sigma.

3. Индустриално подготвен развъден клас Murigran (като контролен клас) 4. Развъден клас Murigran с 4, 8 и 12% панталони за салове. 5. Варени семена от соя, грах и боб, използвани в предишни проучвания-

рен [4]. Соята (сорт Ajma) съдържа, напоена, сварена и изсушена (43,4% протеин; 5,9 йо разтворим трион). Грах, съдържащ се, накиснат, варен и предварително изсушен (22,6 протеин; 3,4% разтворими захариди). Бял боб, накиснат, варен и предварително изсушен (23,8% протеин; 3,3% разтворими захариди).

6. За да се определи стойността на pH на съдържанието на дебелото черво, животните са били хранени и с други налични в търговската мрежа продукти: ечемичен грис, овесени люспи, пшеничен хляб, варени картофи и сухо мляко.

МЕТОДИ I. рН на чревното съдържимо е измерено с помощта на радиометър рН-метър (с две чаши и

Каломелни електроди) с точност до 0,05 (средни стойности от 3 определяния, които са извършени паралелно на едно и също чревно съдържание на едно и също животно).

2. Тъй като стандартът на α-галактозидаза не беше достъпен за нас, реалните изследвания бяха предшествани от въвеждащи методически експерименти: те включваха производството на непречистен ензимен препарат от бирена мая, определянето на оптималните условия за ензимна хидролиза in vitro за рафиноза и сравнението на ефекта на получения дрожден препарат с ензимния ефект на съдържанието на дебелото черво на плъховете.

В крайна сметка следното се счита за оптимално за ензимна рафинова хидролиза (in vitro): pH = 6,0 (буферна смес на лимонена киселина: 9,5 ml 0,1 M лимонена киселина (21,0 g/l) + 4,5 ml 0,1 M натриев цитрат C., Н, 0, Na3 х 2Н, О (29.41 g/l), допълнени до 100 ml с Н, О); концентрация на ензима, съответстваща на 2 ml от препарата (или 40 mg от чревното съдържание), концентрация на захарид в пробата от 0,2 g; изпитвателна температура от 37 "С в продължение на 2,5 часа.

При посочените условия 30 μl от пробата бяха забелязани върху попиващата хартия; това даде добра хроматографска картина на захаридите, получени чрез хидролиза на рафиноза, както с приложението на дрожден препарат, така и на ензимите от съдържанието на дебелото черво на плъховете.

Захаридите са идентифицирани чрез хартиена хроматография. Условия: хребет за развитие на хребет, низходящ; Смес от разтворители: етилацетат - оцетна киселина - вода 3: 1: 3; Хартия за ватман No3; Разработка 48 h при 18 "C; техника на потапяне в реагентния разтвор съгласно TREVELYAN [12].

Количеството галактоза се приема като стойност на активността на ор-галактозидазата, която по време на ензимната хидролиза на рафинозата пада под 0. a. Условията стават безплатни. Количеството захариди (продуктите на разпадането на рафинозата) се определя индиректно (като площта на петно, причинено от Ex-

914 Храната 31 (1987) 10

Кривата на плътността се определя директно върху хроматографската хартия, използвайки денситометричния метод 1131).

3. По технически причини бактериологичните изследвания бяха ограничени до определянето на аеробни бактерии в дебелото черво на животните. По време на бактериологичните изследвания животните са получавали различни тестови диети (прием