Антитела срещу дезамидирани глиадинови пептиди

Антитела срещу дезамидирани глиадинови пептиди Сравнение на различни ELISA за диагностика на целиакия при деца Дисертация за придобиване на академична степен Dr. мед. в Медицинския факултет на Университета в Лайпциг, подадена от: Мария Пецолд (родена на Ritter), родена на 3 юни 1984 г. в Лайпциг Ръководител: проф. д-р обратно нат. хабил. Томас Мотес взе решение в Университета в Лайпциг, Медицински факултет, Институт по лабораторна медицина, клинична химия и молекулярна диагностика Решение за присъждане на докторска степен от 27 септември 2011 г.

Съдържание Библиографско описание Списък на съкращенията 1 Въведение. 11 1.1 Определение. 11 1.2 Форми на целиакия и епидемиология. 12 1.3 Диагностика. 13 1.3.1 Клинични симптоми. 13 1.3.2 Серологично изследване. 14 1.3.3 Хистологично изследване. 15 1.4 Патогенеза. 18 1.5 Дезаминирани глиадинови пептиди. 21 2 Цел. 23 3 Методи. 25 3.1 Структура на курса. 25 3.2 Характеристики на участниците. 29 3.3 Определяне на антитела. 31 3.4 Статистическа оценка. 33 3.5 Методологична критика. 35 4 резултата. 37 4.1 Концентрации на антитела при пациенти и контроли. 37 4.2 ROC анализ. 39 4.3 Гранични стойности. 41 4.3.1 Фирмена гранична стойност. 41 4.3.2 Собствена гранична стойност. 42 4.3.3 Собствена гранична стойност за висока чувствителност. 4.3.4 Собствена гранична стойност за висока специфичност. 44 4.3.5 Резултати от тестовете в комбинация. 44

Съдържание 4.4 Коефициенти на вероятност и вероятност след теста. 46 4.5 Концентрация на антитела и етап на блато. 48 4.6 Възрастна зависимост на концентрацията на антителата. 50 4.7 Концентрация на антитела и пол. 50 4.8 Повторяемост. 53 4.9 Казуси. 53 4.9.1 Концентрация на антитела при млади пациенти с целиакия. 53 4.9.2 Хронично възпалително заболяване на червата. 4.9.3 Положителни резултати от биопсия в контролната група. 55 4.9.4 Пациент с целиакия с отрицателен резултат от биопсия. 56 4.9.5 Пациент със селективен дефицит на IgA. 57 5 Дискусия. 59 5.1 Сравнение на DGP тестовете помежду си. 59 5.2 Сравнение на DGP тестове с тестове за антитела срещу естествен глиадин. 60 5.3 Сравнение на DGP теста с тестовете за автоантитела срещу dtg. 61 5.4 Предимства на комбинираните тестове за антитела. 64 5.5 Тестова интерпретация. 64 5.6 Кога може да се откаже от биопсията? 68 6 Резюме. 71 Библиография. 75 Списък на таблици. 87 Списък на фигурите. 88 Декларация за независимост. 89 CV. 91 публикации. 93 благодаря. 101

Диагностика Здравословна лигавица Блат тип 1 Блато тип 2 Блата тип 3а Блата тип 3b Блата тип 3c Фигура 4 Хистологични характеристики на етапите на Марш Здрава лигавица: Лигавицата има нормална вилусна и криптова архитектура. Марш тип 1: нормална архитектура на тънкочревната лигавица, само IELs са увеличени. Марш тип 2: Криптите са удължени в сравнение с тип 1. Блатен тип 3а: Деструктивен тип целиакия с умерена атрофия на вили и хиперплазия на криптите. Блатен тип 3b: Деструктивен тип цьолиакия с дълбока атрофия на вили. Блатен тип 3в: Деструктивна целиакия с тотална атрофия на вилите. (Oberhuber 2001 (Marsh Type 1), всички други изображения: A. Werner and V. Wiechman, Pathological Institute, St. Georg Clinic ggmbh 2009). 17-ти

Въведение Фигура 6 Дезамидиране на глиадин от тъканна трансглутаминаза Вляво: Тъканната трансглутаминаза разделя амоняк от специфични остатъци от глутамин, което води до остатъци от глутамат (аминокиселини с еднобуквен код; глутамин = Q, глутаминова киселина = E, пролин = P, фенилаланин = F). Вдясно: Свързване на антитела (измерено в анализ на луминесценция) от серума на пациент с целиакия към нативната QPQQPFP глиадинова последователност и към дезаминираната QPEQPF последователност. По-силната светлина означава по-силна връзка. (T. Mothes 2009) 22

Методи Фигура 7 Блок-схема за избор на серум От 340 серума, отговарящи на критериите за включване, бяха изключени общо 35 серумни проби. От останалите 305 серума 142 са разпределени към групата пациенти и 163 към контролната група по критериите ESPGHAN. В групата пациенти имаше един участник с отрицателен резултат от биопсия, в контролната група имаше общо четирима участници, чиято хистологична оценка съответстваше на положителен етап на Марш. 28

Методи При 79 от пациентите хистологичното изследване разкри Marsh 3c, при 26 пациенти Marsh 3b, а други 27 бяха класифицирани като Marsh 3a. Бяха ли посочени няколко етапа в хистологичната оценка, напр. Marsh 3a 3c, пациентите бяха разпределени в най-високия етап (в примера Marsh 3c). При четири пациенти само оценката е Marsh 3, петима са класифицирани като Marsh 2. При един пациент с латентна цьолиакия хистологичната оценка е Marsh 1 (ТАБЛИЦА 3). Фигура 8 Брой участници и интервал между вземането на кръв При повече от 50% от участниците в проучването вземането на кръв се извършва между три и нула дни преди биопсията. Други 16% от участниците са взели кръвта си до 20 дни преди или след биопсията. ТАБЛИЦА 3 Брой пациенти по етап Марш Марш етап Марш 1 Марш 2 Марш 3а Марш 3b Марш 3в Брой пациенти 1 5 27 26 79 При четири пациенти е налична само класификацията Марш 3. 30-ти