Налейте MEA Петри

Доказан метод за култивиране на микроорганизми и гъбички е култивирането в чашки на Петри върху полутвърди стерилни агарови култури. Агар-агарът е полизахарид и е направен от червени водорасли. Агарът е в състояние да втвърди/желира водата. Образува се триизмерна мрежа, която оптимално насърчава растежа на здрав мицел.

Инструкции за екстракт от малцов агаров културен носител

2 х 1 литра бутилка мляко от стъкло с капак (почистена)
1 литър дестилирана вода
25 g агар-агар
20 g малцов екстракт (на прах)
По желание: 2 g екстракт от мая + 1 g пептон
Алуминиево фолио
Тенджера под налягане
HEPA филтър
40 x PS чаши на Петри (стерилни)
Парафилм
Дезинфектант стерилиум/антифект
Еднократни ръкавици
Капак за уста

Пригответе MEA

Първо поставете всички съставки в тенджера и загрейте сместа със затворен капак и от време на време разбърквайте, докато всички компоненти се разтворят във водата. След това разпределете разтвора равномерно между двете бутилки с мляко. Тъй като екстрактът от малц може да се разпенва много при кипене, бутилките не трябва да са пълни повече от наполовина.

Сега вземете щедро парче алуминиево фолио - ако фолиото е тънко, трябва да вземете двоен слой - и го поставете върху отворената бутилка с мляко. Сега сложете леко капака и го завъртете леко, за да може да се изравни налягането по време на готвене, но капакът все още не пада от гърлото на бутилката. Сега вземете друго голямо парче алуминиево фолио и го поставете върху капака на бутилката с мляко. Притиснете фолиото надолу и плътно към бутилката. Уверете се, че след това няма капаци в близост до капака. Ако е необходимо, вземете още един слой алуминиево фолио.

Културната среда MEA вече може да бъде стерилизирана за 20 минути при 121 ° С в автоклава.

Стерилизирайте MEA

За целта напълнете тенджерата с вода, така че бутилките да са около 3-5 см във водата. Използвайте и ситовата вложка на тенджерата, така че бутилките да не стоят директно на пода. В противен случай съществува риск стъклото да се счупи или екстрактът от малц да се утаи в хранителната среда поради прекалено високи температури (натрупване).

Когато автоклавът достигне работната си температура, започва времето за стерилизация от 20 мин. След това оставете съда да се охлади малко. Междувременно можете да подготвите работното си място пред HEPA филтъра.

Подгответе работното място на HEPA филтъра

Стартирайте своя HEPA филтър поне 15 минути преди започване на работа. Почистете добре работната повърхност с повърхностен дезинфектант и пригответе чашите на Петри. Бутилките с мляко с MEA, които все още не са охладени, са най-безопасни за охлаждане, преди филтърът да работи. Веднага след като разтворът на MEA достигне приблизително 50 ° C, можете да напълните чашите на Петри с него.

Налейте и запечатайте чашките на Петри

За целта сложете ръкавици за еднократна употреба и маска за лице. След това почистете ръцете си с дезинфектант. С него също напръскайте опаковката на чашките на Петри. Също така навлажнете повърхността на бутилката за мляко и алуминиевото фолио с дезинфектант. Сега отстранете фолиото колкото е възможно повече, за да можете да свалите капака. Разрежете опаковката на чиниите на Петри с чист/стерилен нож и извадете толкова много чаши на Петри наведнъж, колкото можете да ги сложите с една ръка отгоре. Поставете съдовете един върху друг и отворения ви MEA разтвор до тях. Почистете ръцете си отново с дезинфектант и след това започнете да сипвате чиниите на Петри.

За целта хванете с една ръка петриевите блюда отгоре и оставете само долната част на долния съд. Вземете бутилката с мляко с другата ръка и бързо изсипете разтвора в купата. Сложете отново всички чаши на Петри, подредени една върху друга и този път ги вземете, с изключение на най-ниско вече налитата чаша на Петри и долната част на втората чаша на Петри, които вече можете да напълните с MEA и др. По този начин чашите на Петри могат да се втвърдят бавно и само малко конденз.