Клетка адхезия

Принцип на модела на потока

Набирането и активирането на тези левкоцити е многоетапен процес, който, наред с други неща, търкалянето,

(А) Приготвяне на HUVEC, получен от вени на пъпната връв; (B) камера на потока и система за перфузия, както и (C) видеодокументация на прилепнали клетки, използващи поточния модел. включва стабилна адхезия на левкоцитите към ендотела, трансендотелната диапедеза и хемотактично контролирана миграция към мястото на възпаление.

Ендотелните и левкоцитни адхезионни молекули от семействата на селектин и интегрин (напр. E-, P- или L-селектин и LFA-1 (CD11a/CD18), VCAM, ICAM) са от съществено значение за екстравазацията на неутрофили по време на възпалителни процеси, тъй като те медиират процесите на клетъчна адхезия, споменати по-горе.

Като част от in vitro модел за изследване на адхезията и търкалянето, ендотелните клетки (HUVEC клетки) първо се култивират върху микроскопски стъкла. След достигане на сливането клетките се поставят в поточна камера и левкоцитите се прекарват през ендотелните клетки с перфузионна помпа, при което вътресъдовите сили на срязване могат да бъдат изчислени и коригирани.

Горно ляво изображение.

Принцип на статичния модел

Като част от in vitro модел за изследване на адхезията, ендотелните клетки (HUVEC клетки) първо се култивират върху плочи с много ямки, както в поточния модел. След достигане на сливане клетките се стимулират с подходящите активатори и се инкубират с предварително оцветени едноядрени клетки (Т лимфоцити) и след това интензивността на оцветяването се измерва флуориметрично, което е пропорционално на прилепналите клетки.

Багрилото калцеин-АМ се използва за оцветяване на мононуклеарните клетки. Това нефлуоресцентно багрило прониква в клетъчната мембрана и се разцепва вътреклетъчно от неспецифични естерази и се образува флуорогенен, непропусклив калцеин. Калцеинът, известен също под името Fluorexon, е производно на флуоресцеина и има своя максимум на възбуждане при 495 nm (възбуждане) и своя максимум на излъчване (емисия) при 515 nm и по този начин може да бъде записан количествено в четеца на Fluoroscan.

Опитна оценка

Използвайки документация, поддържана от видео, сериите изображения се оценяват в обхвата на модела на потока и се записва закрепването на мононуклеарните клетки на единица изображение.

Фигура горе вдясно.

Разход за модел на потока

Прибл. 100 € за 4-ямков мултиплит

Статична цена на модела

Пример за приложение

Влияние на млечните олигозахариди върху адхезията на левкоцитите към човешките ендотелни клетки (Bode et al. 2004a, b и Reiss et al. 2004)